超微粉碎技術(shù)提高愈風(fēng)寧心片溶出度的研究
蘇瑞強,林峰,李杰, 莊建民
山東魯南制藥廠(chǎng),山東 臨沂276003
愈風(fēng)寧心片為葛根藥材乙醇提取物與葛根細粉經(jīng)混合制粒、壓片而成,《中國藥典》2000年版一部
以葛根素作為指標成份控制;本品具有解頸止痛、增加腦及冠狀動(dòng)脈血流量的作用。用于高血壓頭暈,
頭痛,頸項疼痛,冠心病,心絞痛,神經(jīng)性頭痛, 早期突發(fā)性耳聾等病癥[1]。 其主要有效成份為葛根
素,據報道其口服給藥在動(dòng)物體內生物利用度較低,有關(guān)人體內生物利用度的研究尚未見(jiàn)報道[2,3]。鑒
于固體口服制劑的生物利用度與藥物溶出度密切相關(guān), 我們研究了葛根細粉的粉碎工藝技術(shù)與愈風(fēng)寧
心片溶出度的關(guān)系,現報道如下。
1、儀器與試藥
BJ-2型崩解儀(天津市國銘醫藥設備公司);RCZ-8A型智能藥物溶出儀(天津大學(xué)精密儀器廠(chǎng)); LC-10A 高效液相色譜儀(LC-10AD 泵,SPD-10AUV 檢測器,C-R7A 數據處理機),Shim-Pack-ODS
(6.0×150mm)柱;JL9200 激光粒度儀(濟南微納儀器有限公司);葛根素對照品 (中國藥品生物制
品檢定所);葛根藥材(購于陜西鎮平縣醫藥公司),經(jīng)鑒定為豆科植物野葛Pueraria lobata(Willd.)Ohwi
的干燥根;SF-60 型普通粉碎機(常熟中藥制藥機械廠(chǎng));試驗型微粉機甲醇、乙醇為分析純。
2、實(shí)驗方法
2.1樣品制備
2.1.1葛根浸膏提取
取葛根粗粉850g,用85% 乙醇加熱回流提取三次,第一次加8倍量提取4小時(shí),第二、三次各加
6倍量提取3小時(shí),放出濾過(guò),合并濾液,回收乙醇,減壓濃縮至相對密度為1.32(70℃)放出即得。
2.1.2葛根細粉的制備及粒度分布檢查
細粉A:用普通粉碎機(羅底100目)將葛根片粉碎后再過(guò)200目細篩即得。
細粉B:每次取葛根片400g投進(jìn)三清易辰微粉機粉碎13分鐘(此時(shí)間經(jīng)實(shí)驗以100%過(guò)200目篩確定)放出即得。
粒度分布檢查:利用激光粒度儀對細粉A、細粉B的粒度(0.6~90µm)分布情況進(jìn)行了檢測。
2.1.3片劑制備(素片)
片A:取葛根(850g)提取浸膏與細粉A 150g混合干燥,粉碎后過(guò)100目篩加適量淀粉、羧甲基
纖維素混勻,用70% 乙醇潤濕制粒、干燥整粒,加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片(片重220mg)。
片B:取葛根(850g)提取浸膏與細粉B 150g 混合干燥,粉碎后過(guò)100目篩加適量淀粉、羧甲基
纖維素混勻,用70% 乙醇潤濕制粒、干燥整粒,加0.5%硬脂酸鎂混勻后壓片1000片(片重220mg)。
2.2溶出度研究
2.2.1色譜條件
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相:甲醇-水(25∶75);流速1ml·min-1;柱溫為室溫;
檢測波長(cháng)為250nm。
2.2.2崩解度測定
按《中國藥典》2000年版一部片劑通則項下崩解時(shí)限的檢驗方法,取三批片A樣測得的崩解時(shí)限
分別為42±3min,44±2min,45±2min;取三批片B樣測得的崩解時(shí)限分別為43±3min,45±2min,
45±7min;均符合其規定。
2.2.3線(xiàn)性范圍
精密稱(chēng)取葛根素對照品10mg,置25ml量瓶中,加30%乙醇稀釋至刻度,搖勻;分別精密量取0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,置10ml 量瓶中,用30%乙醇稀釋至刻度,在上述色譜條件下測定葛根素
色譜峰面積。以濃度C為橫坐標,峰面積A為縱坐標,按最小二乘法進(jìn)行線(xiàn)性回歸, 得回歸方程C=7.92
×10-2A – 1.86×10-1,r=0.9992,葛根素含量在20~200µg·ml-1線(xiàn)性關(guān)系良好。
2.2.4樣品中葛根素含量測定
取愈風(fēng)寧心片10片(素片),精密稱(chēng)定,研細,取細粉約50mg,精密稱(chēng)定,置具塞錐形瓶中,精
密加入30%乙醇50ml,閉塞稱(chēng)定重量,超聲處理20min,稱(chēng)定重量,用30%乙醇補足減失的重量,搖
勻,濾過(guò),取續濾液作供試品溶液;取供試品溶液10µl,進(jìn)樣測定,得片A的含量為13.62mg/片(n=3),
片B的含量為17.43mg/片(n=3)。
2.2.5溶出度測定
按照《中國藥典》2000年版二部溶出度測定方法中的第一法測定,以水為釋放介質(zhì),每只轉籃中
放置3片,測得的溶出量為平均溶出量;轉速為100r.min-1,平行對片A、片B各測6組。
3、結果
3.1細粉A、細粉B的粒度分布測試結果
表1 細粉A的粒度分布情況
序號 粒度(um) 體積% 累積% 序號 粒度(um) 體積% 累積%
1 0.6-1.2 0.000 0.00 15 27-30 2.302 14.59
2 1.2-3.0 0.000 0.00 16 30-34 2.532 17.12
3 3.0-4.5 0.006 0.01 17 34-38 3.276 20.40
4 4.5-6.2 0.372 0.38 18 38-42 3.757 24.16
5 6.2-7.6 0.534 0.91 19 42-46 4.102 28.26
6 7.6-9.2 0.802 1.71 20 46-50 4.306 32.57
7 9.2-11.4 0.871 2.58 21 50-54 4.402 36.97
8 11.4-12.8 1.089 3.67 22 54-58 4.688 41.66
9 12.8-14.2 1.102 4.77 23 58-62 10.372 52.03
10 14.2-15.8 1.123 5.89 24 62-66 14.249 66.28
11 15.8-17 1.151 7.04 25 66-70 17.901 84.18
12 17-20 1.301 8.34 26 70-75 15.618 99.80
13 20-24 1.682 10.02 27 75-80 0.201 100.00
14 24-27 2.266 12.29 28 80-90 0.000 100.00
表2 細粉B的粒度分布情況
序 號 粒度(um) 體積% 累積% 序 號 粒度(um) 體積% 累積%
1 0.6-0.9 0.000 0.00 15 14-17 5.167 32.32
2 0.9-1.3 1.824 1.82 16 17-20 6.079 38.40
3 1.3-2.0 3.445 5.27 17 20-24 6.890 45.29
4 2.0-2.5 1.216 6.48 18 24-28 7.599 52.89
5 2.5-3.2 0.810 7.29 19 28-32 7.801 60.69
6 3.2-4.0 1.014 8.31 20 32-36 7.497 68.19
7 4.0-5.2 1.419 9.73 21 36-40 7.36 75.58
8 5.2-6.0 0.912 10.64 22 40-45 7.194 82.78
9 6.0-6.8 1.216 11.85 23 45-52 6.687 89.46
10 6.8-7.7 1.722 13.58 24 52-60 5.268 94.73
11 7.7-8.7 2.330 15.91 25 60-70 3.445 98.18
12 8.7-9.9 3.040 18.95 26 70-75 1.732 99.91
13 9.9-12 3.749 22.70 27 75-80 0.089 100.00
14 12-14 4.458 27.15 28 80-90 0.000 100.00
注:200目篩孔內徑為75μm,300目篩孔內徑為47μm,5μm相當于2000目。
3.2溶出度測定結果
表3 愈風(fēng)寧心片累積溶出率(%)
時(shí)間/min A B 時(shí)間/min A B
10 3.2±1.6 6.5±7.2 40 42.9±1.5 71.3±1.4
15 7.8±8.1 16.2±1.4 45 56.2±2.3 82.4±1.8
20 11.5±5.3 26.7±2.1 50 62.1±5.6 91.6±4.1
25 17.8±4.3 34.2±1.7 55 66.8±7.5 93.2±5.8
30 24.6±6.1 45.6±8.2 60 69.6±6.4 96.8±5.2
35 31.4±2.6 56.4±5.2
注:n=6
3.3片A、片B溶出度比較
表4 愈風(fēng)寧心片溶出度比較
樣 品 T50/min P
A 43.2±6.1 <0.01
B 32.5±3.5
3.4同種粉碎工藝技術(shù)制備不同批次制劑的溶出度穩定性比較
表5 愈風(fēng)寧心片不同批次間溶出度比較
樣 品 批 號 T50/min P
010426 43.5±5.6
A 010427 48.6±2.6 <0.05
010428 58.5±6.2
010424 32.8±1.7
B 010422 33.2±3.4 >0.05
010421 33.0±1.2
4、討論
4.1植物細胞中的有效成份需經(jīng)過(guò)浸潤、溶脹、滲透和擴散方能溶出,超微粉碎技術(shù)一方面可使生
藥細粉的表面積大大增加,提高藥物的溶出速度,從而有利于藥物的吸收[4];另一方面超微粉碎技術(shù)
可使植物藥細胞破壁率達90%,從而使植物細胞中的有效成份直接暴露出來(lái)并進(jìn)入體液,提高其生物
利用度[5],這是本實(shí)驗中超微粉碎技術(shù)制得的制劑溶出度遠大于普通粉碎技術(shù)制得的制劑的原因所在。
有關(guān)本實(shí)驗制劑的生物利用度有待進(jìn)一步研究。
4.2固體制劑的溶出度與原輔料的物化性質(zhì)、制劑工藝等因素密切相關(guān),不同廠(chǎng)家因采用不同的原
輔料和生產(chǎn)方法,必然造成溶出度有較大差異,建議應通過(guò)研究對愈風(fēng)寧心片溶出度作出統一的評價(jià)
標準及控制標準,以此保證其臨床療效。
4.3采用普通粉碎技術(shù)獲得的愈風(fēng)寧心片不同批次間溶出度存在較大差異,原因可能與其獲得的藥
粉不能全部位過(guò)篩有關(guān),葛根纖維性較強,利用普通粉碎機不能加工至全部位達到微米中藥(1~75µm)
的細度,不僅每次粉碎所得的細粉在粒度上差異大, 而且在所含組織或部位上亦有差異,進(jìn)而所含有
效成份也就不同;超微粉碎經(jīng)過(guò)試驗確定出全過(guò)篩(200目)粉碎時(shí)間是以藥材全部入
藥為前提的,所以各批次之間差異很小,由此看來(lái), 利用超微粉碎技術(shù)獲得的生藥粉制劑,更符合中
醫處方用藥的要求。
4.4轉籃法測定溶出度通常為每籃放1片,考慮到本實(shí)驗含量測定方法的線(xiàn)性范圍及片劑的葛根素
含量,改為每籃放3片。